Качество проб от игл EBUS-TBNA и тестирования на молекулярную патологию

Новые требования к выбору иглы для анализов ядер тканей, клеточных блоков, NGS и анализов PD-L1

https://profed.olympuschina.com/gs/thoracicsurgery/12628/

В эпоху прецизионной онкологииЕВУС-ТБНАдолжны ответить не просто «Это рак?» но также обеспечивает: гистологическое подтипирование (аденокарцинома/плоскоклеточный рак/крупноклеточный рак/НМРЛ-NOS), Ki-67, окрашивание TTF-1/p40, экспрессию PD-L1 (клоны 22C3/SP142 и т. д.) и профилирование драйверных мутаций (EGFR, ALK, ROS1, BRAF, MET, RET, KRAS и широкие панели NGS). Для этого требуется выход ДНК, обычно варьирующийся от 10 до 250 нг на процедуру (в зависимости от платформы), при сохранении архитектуры ткани для возможностей ИГХ, превышающих возможности традиционных цитологических мазков FNA. Следовательно, конструкция иглы EBUS развивается в сторону «захвата ткани» (выход FNB/сердцевина).

Типы образцов и соотношения игл:

• FNA (тонкоигольная аспирация):​ Иглы 21G/22G с односторонним срезом-срезом-+ аспирация под отрицательным давлением → скопления клеток + фрагменты стромы → мазки (Diff-Quik/H&E) + клеточный блок. Блоки клеток позволяют проводить ИГХ и некоторые молекулярные исследования, но ограниченный объем ткани может препятствовать адекватности ДНК для всего-экзома или больших панелей NGS.
• FNB (тонкоигольная биопсия):​ Иглы Franseen с тройным-краем, корончатым-срезом или обратным-скосом ProCore → тканевые полоски/микро-стержни → фиксированные, заделанные секции. Сохраняет архитектуру ткани, обеспечивая превосходное качество ИГХ и более высокий выход ДНК/РНК по сравнению с эквивалентными клеточными блоками FNA.
• Иглы большого-просвета 19G:​ Больший внутренний диаметр позволяет аспирировать небольшие ядра тканей или большие объемы образцов, что подходит для мультиплексного тестирования, однако необходимо проявлять бдительность в отношении загрязнения крови, влияющего на качество образцов.
• Интеграция ROSE (быстрая-оценка объекта):​-Цитопатологи/технические специалисты на месте предварительно оценивают мазок на наличие "адекватной клеточности", некроза, гранулем или лимфоидной ткани, что принимает решение о прекращении отбора проб или смене станции. ROSE снижает среднее число проходов иглы (часто 3-4 по сравнению с. 6-7 без ROSE) и повышает показатель адекватности образцов. Некоторые центры используют фазово-контрастную микроскопию для сортировки клеточных блоков.

Последствия для выбора иглы, обусловленной молекулярным тестированием:​ Для пациентов с НМРЛ, проходящих таргетную оценку и оценку иммунотерапии, рекомендуется отдавать приоритет иглам 19G FNB или 21G Franseen FNB, если таковые имеются, обеспечивая отбор проб как минимум с 2-3 станций для создания как клеточных блоков, так и ядер тканей. При цитологическом скрининге можно использовать иглы FNA 22G, но требуется увеличение количества проходов и подготовка клеточного блока. Исследования показывают, что показатели успеха NGS имеют тенденцию выше при использовании образцов, полученных с помощью игл 19G, по сравнению с 22G FNA, особенно для богатых стромой или малоклеточных опухолей.

Примеры рекомендаций по обращению (часто подробно описаны в инструкциях по использованию - IFU):​ Немедленно промойте просвет иглы после пункции-буфером BSA/PBS в пробирку для сбора → обработайте клеточный блок (фиксация формалином → заливка в парафин) или зафиксируйте ядра тканей непосредственно в формалине. Предотвратите высыхание просвета, чтобы избежать клеточной дегенерации. Устраняйте засорение, осторожно продвигая стилет или применяя короткие воздушные потоки,-подчеркивая функциональное назначение стилета (предотвращение засорения + сохранение целостности образца).

В заключение, выбор иглы EBUS-TBNA смещается от «просто проникающей» к «индивидуальной настройке типа иглы и рабочего процесса на основе требований молекулярной патологии». Эта эволюция представляет собой фокус междисциплинарного сотрудничества между медицинскими онкологами, патологами и интервенционными пульмонологами.